簡單介紹哺乳動物蛋白表達的定義

   蛋白表達系統(tǒng)是指由宿主、外源基因、載體和輔助成分組成的體系。通過這個體系可以實現(xiàn)外源基因在宿主中表達的目的。一般由以下幾個部分組成：宿主表達蛋白的生物體。可以為細菌、酵母、植物細胞、動物細胞等。由于各種生物的特性不同，適合表達蛋白的種類也不相同。載體載體的種類與宿主相匹配。根據(jù)宿主不同，分為原核（細菌）表達載體、酵母表達載體、植物表達載體、哺乳動物表達載體、昆蟲表達載體等。載體中含有外源基因片段。通過載體介導(dǎo)，外源基因可以在宿主中表達。輔助成分有的表達系統(tǒng)中還包括了協(xié)助載體進入宿主的輔助成分。比如昆蟲-桿狀病毒表達體系中的桿狀病毒。

　　哺乳動物蛋白表達系統(tǒng)的優(yōu)勢能實現(xiàn)翻譯后修飾及正確的蛋白折疊復(fù)性：哺乳動物為真核細胞，細胞器可以對蛋白正確折疊加工。表達水平高:載體可在哺乳動物細胞中高表達重組蛋白，表達量可高達1-3g/L蛋白表達高效穩(wěn)定：高效啟動子控制，穩(wěn)定表達，并可以選擇多種表達系統(tǒng)選項：瞬時表達、穩(wěn)定細胞株表達、營養(yǎng)缺陷型細胞株表達(DHFR/GS)、大規(guī)模懸浮細胞表達等適合大規(guī)模蛋白表達:常用的哺乳動物表達宿主細胞（HEK293和CHO），使用懸浮細胞培養(yǎng)，可以在一個月內(nèi)可產(chǎn)生數(shù)克級蛋白。

　　當(dāng)然哺乳動物表達系統(tǒng)也有它的劣勢：曾經(jīng)，使用哺乳動物細胞表達重組蛋白質(zhì)的最大問題是是效率低，所表達的蛋白質(zhì)水平低。然而，諸如HEK293和CHO的細胞系已經(jīng)分別被開發(fā)為有效的瞬時和穩(wěn)定表達系統(tǒng)。方法原理是使用脂質(zhì)體、磷酸鈣或PEG作為轉(zhuǎn)染試劑瞬時轉(zhuǎn)染HEK293細胞。雖然瞬態(tài)表達相對容易和簡單，但擴大規(guī)模卻在技術(shù)上存在挑戰(zhàn)性。CHO細胞通常用于穩(wěn)定表達大量重組蛋白。